Terug naar de hoofdpagina opdrachten
Opdrachten les 10
Source: https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/4/49/Shakeflask.JPG/445px-Shakeflask.JPG
Berekenen specifieke activiteit
Je hebt net een cupje van het enzym invertase gekocht. Het cupje bevat 5 mg eiwit. Je lost het cupje op in 1 ml buffer.
Invertase activiteit is te meten met een spectrofotometrische bepaling.
Je leest in een protocol:
Invertase activity can be measured indirectly using 3,5-dinitrosalicylic acid (DNS) reagent. This reagent reacts with reducing sugars to form 3-amino-5-nitrosalicylic acid, which strongly absorbs light at 540 nm.
The absorbance at 540 nm was recorded for a 1 cm cuvet filled with the following solutions:
- 0,9 mL substrate solution in buffer
- 0.1 mL sample solution
Je meetresultaten uit het logboek:
In 10 minutes the absorbance was increased from 0.000 to 0.970 (increase was linear). The molar absorption coefficient of the product formed is 34000 M-1 * cm-1.
Calculate the specific activity of the enzyme in the protein sample. (U/mg protein sample)